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斷腸草提取物對小鼠的急性毒殺研究

欄目:滅老鼠 文章出處:網絡 人氣:0 發表時間:01-01

斷腸草提取物對小鼠的急性毒殺研究

(斷腸草提取物對小鼠的急性毒殺研究)

  【摘要】

  目標探討斷腸草提取物對小鼠的毒力作用.

  方法灌胃法.

  結果斷腸草提取物對小鼠存在很強的鴆殺作用.一次性注射0.5m

  L、濃度為0.003、0.004、0.005g/ml的斷腸草提取物時,小鼠在30min內的逝世亡率分辨為8.33%、41.67%、100%.同時,斷腸草提取物對小鼠的鴆殺作用敏捷.當濃度為0.005g/ml時,小鼠在20min內全部逝世亡,均勻致逝世時光為12.8min;濃度為0.004g/ml時,試鼠在28min內逝世亡了5只,殘余的2d內未見逝世亡;濃度為0.003g/m,l試鼠在16min時逝世亡1只,殘余的2d內仍未見逝世亡.中毒小鼠均表示出活動緩慢,步調不穩,身材抽搐,膚色變黑等一些癥狀.

  論斷斷腸草提取物對小鼠鴆殺作用明顯,所需劑量少,致逝世時光短,為開動員物性滅鼠劑供給了技巧參考.

  鼠類不僅品種多、個體數量多,而且成長發育快,存在強盛的滋生力、散布廣、迫害重大等.目前防治鼠害的方法重要有化學滅鼠、生物滅鼠、人工機械滅鼠等.長期以來利用最多、最廣的為化學滅鼠.但化學滅鼠會使害鼠易產生耐藥性跟拒食性,導致防效降落,且造成環境沾染,產生二次中毒[1].斷腸草(GelesemiumelegansBenth)屬馬錢科(Logani-

  aceae)胡蔓藤屬(Gelesemium),俗名大茶藥、胡蔓藤等,為多年生常綠藤本動物.斷腸草在醫藥、畜牧業跟農業方面都有開發跟利用[2-3],尤其在醫藥方面開發利用的很多,研究表明斷腸草有抗腫瘤、免疫調節、鎮痛、醫治皮膚病、擴瞳等作用.斷腸草含多種鉤吻堿,有劇毒,民間常用作殺蟲劑,故亦名"菜蟲

  藥".駱悅等[4]發明,斷腸草甲醇粗提物及斷腸草

  生物堿對福壽螺幼螺跟成螺有良好的把持作用.然

  而斷腸草對害鼠的研究鮮見報道,本文抉擇斷腸草

  提取物,研究對小鼠的毒力作用,為進一步研制動物

  性殺鼠劑供給技巧參考.

  1資料與方法

  1.1小鼠實驗于2010年3~4月在廣東省惠州南生成物科技有限公司進行.實驗小鼠取自該公司養殖的昆明種小鼠,滋生多代,選取體重18~22g的健康小鼠做為實驗對象.

  1.2斷腸草乙醇提取物(膏狀)由惠州南生成物科技有限公司經索氏抽提提取并供給.

  1.3試劑75%乙醇,蒸餾水等,市售.

  1.4儀器電子天平、注射器、棕色小瓶、量筒、燒

  杯、玻璃棒.

  1.5方法采取灌胃法[5],操作步驟如下:以左手捉持小鼠,使腹部朝上,頸部拉直.右手持灌胃管(由1~2ml注射器上連接磨去針尖的針頭制成).灌胃管長約4~5cm,直徑約1mm,先從小鼠口角插進口腔內,而后用灌胃管壓其頭部,使口腔與食道成始終線.再將灌胃管從舌面緊沿上腭進入食道,灌胃管插入約1/2處將藥液注入.若遇阻力,應退出灌胃管再插入,留神操作時動作要輕.

  1.6斷腸草提取物毒性實驗

  1.

  6.1斷腸草提取物藥液的配制用電子天秤稱取斷腸草提取物1g,用10ml的20%乙醇溶解,攪拌均勻,配制成濃度為0.1g/ml的斷腸草提取物母液,盛于棕色小瓶中,放入4%冰箱保存.利用時以10倍梯度濃度稀釋母液,分辨配制成0.1、0.01跟0.001g/ml3個濃度藥液.

  1.

  6.2斷腸草提取物毒性料想定將小鼠按A(0.1g/ml)、B

 ?。?.01g/ml)、C

 ?。?.001g/ml)分為3組,每組4只小鼠,禁食12h后用灌胃法對小鼠一次性注射0.5m,l而后畸形豢養,察看小鼠的反應,記錄小鼠逝世亡時光及逝世亡數量.每個組重復3次.

  1.

  6.3斷腸草提取物毒性測定隨機選取48只小鼠,按A

 ?。?.005g/ml)、B

 ?。?.004g/ml)、C

 ?。?.003g/ml)、D

 ?。?.002g/ml)分為4組,每組4只試鼠,重復3次,實驗方法同

  1.

  4.2.

  1.

  6.4小鼠中毒反應察看灌胃后5d內察看記錄各組小鼠在注射后的反應及中毒癥狀.

  2結果與剖析

  2.1鴆殺預實驗測定灌胃0.5ml斷腸草提取物對小鼠的鴆殺料想定結果見表1.0.1g/ml斷腸草提取物處理后,小鼠在12min內全部逝世亡,均勻致逝世時光為7.4min;注射灌胃斷腸草提取物0.01g/m,l小鼠在21min內全部逝世亡,均勻致逝世時光為13.3min;而灌胃斷腸草提取物0.001g/ml時,在2d內未見小鼠逝世亡.同時還可看出,當提取物濃度在0.01g/ml以上時,隨著濃度的增加小鼠逝世亡時光縮短.由此表明,斷腸草提取物在濃度達0.01g/ml以上時對小鼠有較強的鴆殺作用.故毒性實驗中采取0.01~0.001g/ml濃度進行測定.

  2.2毒性實驗結果灌胃0.5ml斷腸草提取物對小鼠的毒性實驗結果(表2).當灌胃濃度為0.005g/ml時,試鼠在20min內就全部逝世亡,均勻致逝世時光為12.8min;當灌胃濃度為0.004g/ml時,試鼠在28min內逝世亡了5只,殘余的2d內未見逝世亡;當灌胃濃度為0.003,試鼠在16min時逝世亡1只,殘余的2d內未見逝世亡;灌胃濃度為0.002g/ml時,2d內均未見小鼠逝世亡.

  從表2中可看出,小鼠的逝世亡率隨著濃度的降落而降落,逝世亡時光也向后推遲.灌胃濃度在0.005g/ml以上,小鼠在20min內全部逝世亡.灌胃濃度為0.003g/ml以上時,28min內小鼠逝世亡率為41.67%.灌胃濃度達0.003g/ml時,小鼠的逝世亡率很低,僅為8.33%,表明對小鼠有明顯鴆殺作用的濃度為0.003~0.005g/m,l且在這可致逝世濃度范疇內,隨著作用劑量的增加,小鼠的致逝世時光縮短.

  2.3小鼠中毒癥狀察看灌胃后,最初小鼠無異樣;5min左右,小鼠活動緩慢,步調不穩,蜷縮著,頭部開端抽動,緩緩地小鼠全身顫抖;再過一段時光后,小鼠開端活潑跳動,在鼠籠內到處竄跳,顫抖更加厲害;瀕臨逝世亡時,小鼠連續掙扎,前腿不動蹬后腿,1min左右抽搐不止直至逝世亡.同時,小鼠在掙扎進程中,身材膚色由原來的粉紅色逐步變黑,眼睛外突.此外,察看還發明,有些小鼠在后期會呈現磨牙景象.

  3論斷

  研究結果表明,斷腸草提取物對小鼠鴆殺作用明顯,存在急性致逝世的后果.在可致逝世濃度范疇內,隨著灌胃濃度的增加,小鼠的致逝世時光減少,個別致逝世時光約30min.當斷腸草提取物濃度在0.005g/ml以上時,20min內小鼠全部逝世亡.同時灌胃后小鼠存在一個短暫的埋伏期,約5min左右.之后,小鼠則開端表示出一些全身顫抖、抽搐等癥狀,直至逝世亡.據研究報道,斷腸草植株中含有的活性成分叫鉤吻堿,屬于吲哚類堿,植株各局部生物堿的含量以根皮部(1.5%~2.2%)為最高,莖皮(1%~1.1%)次之,莖含量為0.4%~0.5%,葉含量僅0.3%[3].這為下一步分別跟提純殺鼠活性成分,為斷腸草作為動物源滅鼠劑的開發供給了依據.

  在實際防控工作中,因為化學藥物一直呈現抗性、公害等問題,人們越來越偏向于從天然物質中尋找更保險、更有效的活性物質,以開發新型的動物源農藥.動物性農藥來源于天然,有其順暢的降解途徑,無殘毒遺留,不沾染環境,不易產生抗藥性,因此受到普遍關注.韓崇選等[6]對多種動物進行了殺鼠活性的測定,發明曼陀羅、苦參、鐵棒錘等動物對試鼠存在較強的鴆殺活性,且無二次中毒景象產生.詹紹琛等[7]用鬧羊花進行滅鼠實驗,表明鬧羊花葉煎劑灌服或毒餌試鼠都有較強的毒性.張美文等[8]將煙草水煮液與玉米粉、面粉餌料按一定的比例制成的毒餌豢養小鼠,表明煙草對鼠類也存在較好的鴆殺作用.我國動物質源極為豐富,對動物源農藥的研究歷史久長,有豐富的教訓跟深沉的基本.因此,研究與開發保險性高的動物性滅鼠劑,將成為現今新型滅鼠劑研制的熱點,對解決當前化學滅鼠劑所引起的社會跟環境問題存在重要的意思.

 

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